野生酵母第一階段培養
描述
本篇為實驗設計，作個人申請多元表現作品。最終目的為從野生酵母中純化出酵母菌投入使用，供培養老麵種增加麵包的發酵香氣並避免野生酵母造成食物中毒。
環境要求：不需專業滅菌設備，有壓力鍋佳。
實驗可擴充方向：完成本實驗⟹稀釋，以劃線法在平板培養基上分離微生物(開始需滅菌設備)⟹將數個單一酵母菌菌落分別在試管中製成懸浮液，再次以劃線法純化⟹將數個酵母菌的單一菌落繼續純化6次⟹以液體培養基擴培（可投入應用）
份量
食材
-
75g*5盒
-
265mL*5瓶
-
75mL
-
2L
-
265mL*1瓶
-
150mL
-
3個
步驟
-
◎階段一：消毒，降低環境生菌數
-
玻璃器材洗淨，放入大鍋，注冷水超過玻璃器材2倍高度。
-
蓋上鍋蓋，將步驟一之水加熱至沸騰，小火維持沸騰狀態持續1小時。
-
關火，不開鍋蓋靜待冷卻。
-
實驗環境架設兩盞紫外線燈，並將長袖襯衫懸掛在該空間，確保襯衫正面、袖子、工作檯皆能受到紫外線照射。 開啟紫外線燈，消毒時間1小時，人員、動物需離開房間。
-
葡萄汁外瓶以75º酒精溶液消毒，次數3。 ＃消毒階段完成
-
◎階段二：潤洗器材
-
雙手以75º酒精消毒，範圍：手掌、前臂。
-
穿戴完成消毒的襯衫並佩戴口罩。
-
將雙手戴上手套。
-
從水中取出冷卻的玻璃器材。
-
容量瓶以葡萄汁潤洗，用量：一瓶分三次；錐形瓶以威士忌潤洗，用量：150mL分三次。 ◇容量瓶詳細使用方法：https://teaching.ch.ntu.edu.tw/analytical-chemistry-laboratory/2019/07/18/容量瓶的使用法及藥品配製/
-
滴管一支，以葡萄汁潤洗三次；分度吸量管一支，以威士忌潤洗三次。 #潤洗階段完成 ◇分度吸量管詳細使用方法： https://teaching.ch.ntu.edu.tw/analytical-chemistry-laboratory/2019/07/18/體積吸量管及分度吸量管之使用方法/
-
◎階段三：培養基配製
-
容量瓶架上漏斗，倒入兩瓶葡萄汁。
-
將威士忌倒入潤洗完成之錐形瓶，到錐形瓶刻度150mL。
-
取下容量瓶的漏斗。 以安全吸球配合分度吸量管量取75mL威士忌加入容量瓶。
-
-
將包裝瓶內剩餘的葡萄汁倒入乾淨的錐形瓶。
-
蓋上容量瓶的玻璃塞，一手握瓶頸並以大拇指壓住玻璃塞，一手托瓶身。
-
先使容量瓶瓶口指離地面，再使容量瓶瓶口指向地面，最後再使瓶口恢復指離地面，完成一次搖晃。 輕柔的搖晃10次。 ＃培養基配製完成。
-
◎階段四：試樣填裝。
-
換一雙手套。
-
-
將培養基填入葡萄汁包裝瓶，填裝量為瓶頸線。
-
填裝完成後旋上瓶蓋，培養裝置完成。 ＃試樣填裝完成。 ●若使用玻璃容器進行培養，搭配水封使用可避免容器內部氣壓過大造成危險。
-
◎階段五：培養階段
-
將培養裝置放入冰桶以阻絕光線，並放入5瓶2L包裝飲用水以降低溫度波動。 放入完成設定，連接智慧居家程式之無線智慧溫濕度計。 蓋上冰桶蓋子。
-
每日早晚檢查、搖晃培養裝置，檢查產氣量並替換容器內氣體提供酵母繁殖所需的氧氣。若酵母成為優勢族群，將觀察到溶液中不斷有小氣泡上浮。 ＃預期培養總日數：7日 完成培養後取出足量樣本保存於已滅菌100mL果醬瓶。
-
◎實驗後器材清洗
-
液體培養基填裝完成後，即可開始清洗器材。 ●玻璃器材先以清水清洗2次帶走殘留物。 ●玻璃器材以沙拉脫水溶液潤洗1次。 ●玻璃器材以清水潤洗5次。 ●器材煮沸3次。 ●以蒸餾水潤洗器材至器材內壁有一層水膜。 ●晾乾器材，禁止高溫烘乾。
-
完成培養後，將培養容器消毒後作為可回收垃圾處理。 ●將剩餘菌液混合含氯漂白水在容器內反應60mim，比例9：1。 ●水龍頭全開，將溶液倒入下水道，剩餘固體作為一般垃圾處理。 ●容器清洗後作為可回收廢棄物處理。
小撇步
參考資料：
郭曉萍與黃學聰 (民111/06)。〈酵母於飲品的多元開發〉。《生物資源保存及研究簡訊》，第130期。臺灣：財團法人食品工業發展研究所。
公共電視（2024/01/08）。〈世界NO.1台灣野生釀酒酵母菌｜基因遺傳多樣性豐富〉。 《我們的島》 ，第1238集。
張永達 等（民112/06）。《選修生物Ⅵ：生態、演化與生物多樣性》。台灣：泰宇出版股份有限公司。
